關于Tn5轉座酶的原理介紹

　　RNA測序（RNA-Seq）是基于二代測序技術開展轉錄組學研究過程中廣泛使用的一種方法，能夠在特定時間點對生物樣本中的多種RNA進行定性和定量分析。針對RNA測序的常規(guī)建庫方法都需要先將RNA轉換為雙鏈DNA，且需經(jīng)過目標RNA富集及片段化、雙鏈DNA合成、接頭連接、PCR擴增等多個步驟。

　　Tn5轉座酶復合體因能一步打斷雙鏈DNA并且使DNA兩端帶上接頭，而廣泛應用于二代測序建庫等領域。近期也有研究發(fā)現(xiàn)，Tn5轉座酶同樣能以類似的方式作用于RNA/DNA雜合鏈，從而能夠省去傳統(tǒng)RNA建庫技術中的RNA片段化、二鏈合成等繁瑣的操作步驟，進一步拓展了Tn5轉座酶的新用途。此外，Tn5轉座酶也被廣泛用于體外轉基因(外源基因整合到宿主細胞)等各領域。

　　執(zhí)行轉座功能的酶，通常由轉座子編碼，識別轉座子兩端的特異序列，能把轉座子從相鄰序列中脫離出來，再插入到新的DNA靶位點，無同源性要求。

　　EZ-Tn5™轉座酶具有較高的Tn5轉座活性。是高純度，單亞基的酶，可隨機插入EZ-Tn5至任何靶向DNA，每個標準反應插入DNA克隆的量為>106，當用EZ-Tn5轉座子在沒有鎂離子孵育時，形成穩(wěn)定的EZ-Tn5轉座子復合體，特定的認識自然發(fā)生的Tn5和微小的Tn5轉座反應和使EZ-Tn5轉座子具有高活性的端端序列。